测序与成像¶

1. 原位测序¶

使用自动流体系统完成第 1-10 轮测序循环。

2. 形态学染色¶

目标：可视化细胞核和细胞边界。

混合试剂： * DAPI: 5 μg/mL * WGA-Alexa 488: 5 μg/mL

步骤： 1. 洗涤： PBS-T (0.05%) 洗涤 2 分钟。 2. 染色： 泵入 DAPI/WGA 混合液。孵育 15 分钟。 3. 洗涤： 泵入 PBS。 4. 成像： 扫描 DAPI 和 FITC 通道。 5. 清洗管路： 泵入 4X SSC 然后泵入 PBS-T (0.1%) 以去除粘附的 WGA。

3. H&E 染色 (测序后)¶

兼容流动池 (Flow Cell)，无需二甲苯。

苏木精 (Hematoxylin): 2-5 分钟。
漂洗: 去离子水。
分化: 0.5% 盐酸乙醇 (70%) 处理 2-5 秒。时间控制至关重要！
返蓝: Scott's 返蓝液 (1 分钟)。
伊红 (Eosin): 30秒 - 1 分钟。
透明: 95% 乙醇 (切勿使用二甲苯)。
成像: 明场成像。